产品货号：
YTB3065
中文名称：
RNA体外转录质粒pRNA-T3-T7
英文名称：
pRNA-T3-T7
产品规格：
1μg|100μg
发货周期：
1～3天
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pRNA-T3-T7是一种用于体外基于T3或T7启动子(T3 or T7 Promoter)进行RNA转录的空质粒。在该质粒中的多克隆位点插入目的基因并线性化后，就可以作为RNA体外转录的模板。体外转录的RNA可以用于mRNA疫苗、体外蛋白翻译、转染细胞用于目的基因的表达、体外研究翻译调控机制、体外研究RNA降解机制、蛋白与RNA的相互作用等。
pRNA-T3-T7的多克隆位点两侧分别含有T3和T7启动子，在多克隆位点插入目的基因后，可以分别使用T3或T7 RNA聚合酶进行RNA的体外转录。根据RNA转录的方向和插入的目的基因的方向，可以得到目的基因的正义或反义的RNA。本质粒为氨苄青霉素抗性。
| Feature Nucleotide | Position |
| M13 forward primer binding site | 379-395 |
| T3 promoter | 405-423 |
| Multiple cloning site | 424-483 |
| T7 promoter | 484-502 |
| M13 reverse primer binding site | 518-534 |
| lac operator | 542-558 |
| lac promoter | 566-596 |
| ori | 920-1508 |
| Ampicillin resistance ORF | 1679-2539 |
| Ampicillin promoter | 2540-2644 |
| 组分 | 1μg | 100μg |
| pRNA-T3-T7 | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
pRNA-T3-T7质粒(2739bp)的图谱如下:
pRNA-T3-T7的多克隆位点的详细图谱：
- pRNA-T3-T7中没有的酶切位点包括：
Acc65I BbvCI BsmFI BtgZI NaeI PpuMI SgrAI AfeI BclI BsmI ClaI NgoMIV PshAI SnaBI AflII BfuAI BspDI CspCI NheI PsiI SphI AgeI BlpI BspEI DraIII NotI PspOMI SrfI AleI BmgBI BspMI EagI NruI PspXI StuI ApaI BmtI BsrGI Eco53kI NsiI PstI SwaI AscI Bpu10I BssHII EcoNI PacI RsrII Tth111I AsiSI BsaAI BstBI FseI PaqCI SacI XcmI AvrII BsaBI BstEII HpaI PflFI SacII BaeI BseRI BstXI KpnI PflMI SbfI BanII BsgI BstZ17I MfeI PmeI SexAI BbsI BsiWI Bsu36I MscI PmlI SfiI - pRNA-T3-T7中的单酶切位点包括：
AatII G,ACGT`C 2670 MluI A`CGCG,T 454 AccI GT`MK,AC 449 NarI GG`CG,CC 236 AhdI GACNN,N`NNGTC 1751 NcoI C`CATG,G 442 AlwNI CAG,NNN`CTG 1272 NdeI CA`TA,TG 184 ApoI R`AATT,Y 503 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 1899 BamHI G`GATC,C 472 PaeR7I C`TCGA,G 424 BcgI ,NN` (N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 2255 PciI A`CATG,T 859 BglII A`GATC,T 430 PluTI G,GCGC`C 235 BpmI CTGGAG(N)14,NN` 1820 SalI G`TCGA,C 448 BsaI GGTCTCN`NNNN, 1813 SapI GCTCTTCN`NNN, 743 BsaXI ,NNN` (N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 704 ScaI AGT|ACT 2232 BseYI C`CCAG,C 1163 SfoI GGC|GCC 237 BspQI GCTCTTCN`NNN, 743 SmaI CCC|GGG 438 BsrFI R`CCGG,Y 1832 SpeI A`CTAG,T 460 BstAPI GCAN,NNN`NTGC 182 SspI AAT|ATT 2556 BtgI C`CRYG,G 442 StyI C`CWWG,G 442 EcoO109I RG`GNC,CY 2728 TspMI C`CCGG,G 436 EcoRI G`AATT,C 503 XbaI T`CTAG,A 466 EcoRV GAT|ATC 480 XhoI C`TCGA,G 424 HincII GTY|RAC 450 XmaI C`CCGG,G 436 HindIII A`AGCT,T 399 XmnI GAANN|NNTTC 2351 KasI G`GCGC,C 235 ZraI GAC|GTC 2672
pRNA-T3-T7质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
M13 forward primer (379-395):5′-GTAAAACGACGGCCAGT-3′
M13 reverse primer (518-534):5′-CAGGAAACAGCTATGAC-3′
- 本质粒未经我司书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 首次使用1μg包装的本制品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本制品质粒浓度为0.1μg/μl，共1mL。可以在其多克隆位点适当酶切后插入待体外转录的目的基因，或者也可以用无缝克隆技术插入目的基因。
- 在进行体外转录之前构建的质粒必须进行线性化处理。线性化处理时通常选择拟转录RNA的末端位置，这样转录产物的末端就会和预期的一致。需要特别注意的是，插入片段的方向和转录的方向会决定转录产物是正义RNA还是反义RNA，需要根据实验需要设计好，确保获得的是所需的正义或反义RNA。具体的体外转录反应体系可以参考T7 RNA聚合酶和T3 RNA聚合酶。
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